二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染

進(jìn)入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)環(huán)境時，對細(xì)胞存活有害的成分和導(dǎo)致細(xì)胞不純的外來物質(zhì)應(yīng)視為污染。不同的污染物對細(xì)胞的影響是不同的，有些是長期的、緩慢的、潛在的，有些則可以在短時間內(nèi)抑制細(xì)胞生長或殺死細(xì)胞。根據(jù)污染源的不同，可分為生物污染、化學(xué)污染、物理污染和氣溶膠污染。

1、生物污染：

這是最常見也是最有害的污染。如細(xì)菌、病毒、真菌、支原體等。這些污染源可能是人為帶入的，也可能是細(xì)胞放入二氧化碳培養(yǎng)箱之前就被污染了，或者是盒子本身沒有消毒。體外培養(yǎng)的細(xì)胞沒有抗污染能力，培養(yǎng)基中添加的抗生素抗微生物污染的能力有限，所以一旦發(fā)生細(xì)胞的微生物污染，往往無法挽救。

2、化學(xué)污染：

二氧化碳培養(yǎng)箱中的許多化學(xué)物質(zhì)會導(dǎo)致細(xì)胞污染。比如細(xì)胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的清潔劑、加濕器中未凈化的水、人為帶入的液體或氣體都可能是化學(xué)污染源。不同的化學(xué)物質(zhì)對細(xì)胞的污染不同，有些可能促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長，有些甚至可能殺死細(xì)胞。

3、物理污染：

培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素，如溫度、輻射、振動、輻射(紫外線或熒光)都會對細(xì)胞產(chǎn)生影響。物理污染往往被人們所忽視，它主要在代謝水平或分子水平上影響細(xì)胞的正常生理過程。

4、氣溶膠污染：

氣溶膠是液體或固體顆粒均勻懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系。當(dāng)粒子是微生物時，就是微生物氣溶膠。如果微生物是病原性的，那就是病原性微生物氣溶膠。細(xì)菌、病毒和其他病原體可以通過氣溶膠在人與人之間、人與環(huán)境之間傳播。

二氧化碳培養(yǎng)箱污染防治措施

1、選擇二氧化碳培養(yǎng)箱：

二氧化碳培養(yǎng)箱的生產(chǎn)廠家設(shè)計(jì)了多種不同的裝置來減少和防止污染，主要是防污染設(shè)計(jì)和消毒滅菌系統(tǒng)的改進(jìn)，以達(dá)到消毒滅菌的目的。如二氧化碳培養(yǎng)箱帶紫外線消毒功能、二氧化碳培養(yǎng)箱帶HEPA過濾器凈化空氣、二氧化碳培養(yǎng)箱帶高溫殺菌等。后者又可分為高溫干熱和高溫濕熱。這些設(shè)備的殺菌能力不同，紫外線燈的消毒范圍有限。離燈具越遠(yuǎn)或被遮擋，消毒能力越差。

HEPA濾網(wǎng)孔徑有限，無法去除病毒和一些微小細(xì)菌，容易磨損，但也有其局限性。相比較而言，高溫滅菌是一種有效的方法。但高溫干熱和高溫濕熱也是有區(qū)別的，不同方法的殺菌效率與溫度有直接關(guān)系。

2、培養(yǎng)員工習(xí)慣：

人的因素和態(tài)度可以對環(huán)境、人和事物產(chǎn)生積極或消極的影響。為了安全起見，實(shí)驗(yàn)室的工作人員應(yīng)該了解他們的態(tài)度和人為因素對實(shí)驗(yàn)環(huán)境的重要性。因此，實(shí)驗(yàn)室工作人員的專業(yè)培訓(xùn)在污染預(yù)防中起著重要的作用。

3、注重管理：

細(xì)胞室的二氧化碳培養(yǎng)箱要有專人管理，系統(tǒng)要定期校正，至少一年一次。數(shù)值一旦固定，不要隨意調(diào)整，以免影響箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度的波動，降低機(jī)器的靈敏度，也影響二氧化碳培養(yǎng)箱中的細(xì)胞生產(chǎn)狀態(tài)。

使用前應(yīng)對二氧化碳培養(yǎng)箱的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正，使用前對箱體及內(nèi)部進(jìn)行消毒，數(shù)值應(yīng)穩(wěn)定一段時間。一旦發(fā)生緊急情況，應(yīng)及時報告。專業(yè)人員操作，立即采取措施，避免不必要的損失。

4、標(biāo)準(zhǔn)化操作：

二氧化碳培養(yǎng)箱的使用很簡單，但也需要標(biāo)準(zhǔn)化。進(jìn)入細(xì)胞室必須穿實(shí)驗(yàn)服、拖鞋或一次性鞋套。實(shí)驗(yàn)過程中必須佩戴一次性手套，尤其是在打開二氧化碳培養(yǎng)箱之前。打開二氧化碳培養(yǎng)箱前必須用75%酒精噴壺洗手，然后取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板。在顯微鏡下查看細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板后，再放回二氧化碳培養(yǎng)箱，噴酒精消毒。

二氧化碳培養(yǎng)箱的兩個門開關(guān)取(放)東西要快，不能長時間開著，否則會影響CO2的濃度、溫度、濕度，造成污染。特別是不要忘記關(guān)上內(nèi)層的玻璃門。切記開門時不要和二氧化碳培養(yǎng)箱、呼吸、打噴嚏。

5、加強(qiáng)保護(hù)：

如果實(shí)驗(yàn)者患病并攜帶病菌，進(jìn)入細(xì)胞室前應(yīng)戴口罩，但病情嚴(yán)重者不宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)梳理女性的頭發(fā)，以防止頭皮屑污染和相關(guān)事件。如果實(shí)驗(yàn)室條件允許，每人可以佩戴實(shí)驗(yàn)帽、手套和口罩，防止污染二氧化碳培養(yǎng)箱并保護(hù)實(shí)驗(yàn)者本人。

6、注意保養(yǎng)：

二氧化碳培養(yǎng)箱放在電池室內(nèi)，應(yīng)保持干燥，環(huán)境溫度不超過30℃(建議保持在18℃-30℃)。二氧化碳培養(yǎng)箱遠(yuǎn)離門窗、暖氣設(shè)備和空調(diào)管道，不能直接暴露在陽光下。二氧化碳培養(yǎng)箱的桌面必須水平防震，由不燃材料制成，不能靠在墻上或類似建筑物上。后部電源接頭與墻壁之間應(yīng)至少留出30厘米的空間。一旦放好，就不應(yīng)該再動了。

7、矯正治療：

二氧化碳培養(yǎng)箱放好后，對箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒，并系統(tǒng)校正各項(xiàng)指標(biāo)，數(shù)值穩(wěn)定一段時間后再使用。CO2氣體對健康有害，因此應(yīng)在電池室內(nèi)安裝足夠的通風(fēng)設(shè)備?？諝庵械姆蹓m氣溶膠容易造成二氧化碳培養(yǎng)箱的污染，所以需要一個循環(huán)的空氣環(huán)境。將二氧化碳培養(yǎng)箱的管理任務(wù)分配給有經(jīng)驗(yàn)的檢查員是非常重要的。如果長時間不使用二氧化碳，應(yīng)關(guān)閉CO2開關(guān)，以防止CO2調(diào)節(jié)器失效，并避免給實(shí)驗(yàn)室?guī)戆踩鹿省?/p>